Nucleofector™ Technology 電轉殖系統

 

自 2001 年問世以來，Nucleofector™ 是一種基因轉移系統，已被全球研究

機構所採用。Nucleofector 包括多種平台，可滿足不同細胞類型、不同數量、不同通量的轉染實驗需求。

 

 

Advanced Platform

96-well Add-On

High-Throughput Platform

Basic Device

Device

4D-Nucleofector™ System

96-well Shuttle™ Device

384-well Nucleofector™ System

Nucleofector™ 2b Device

 

AAF-1003B (Core Unit）

AAF-1003X (X Unit）

AAF-1003Y (Y Unit）

AAF-1002L (LV Unit)

AAF-1002B (Core Unit）停產

AAF-1002X (X Unit）停產

AAF-1002Y (Y Unit）停產

AAF-1002L (LV Unit)

AAF-1003S

AAU-1001

AAB-1001 停產

 

Throughput (samples per run)

Low to High

(1-16 X Unit)

(1-96 96-well unit)

(24 Y Unit) 

(1 LV Unit)

Low to medium (1-16 X Unit) (24 Y Unit)  (1 LV Unit)

Low to high (1-96)

High (384)

Low (1)

Reaction volume

20 μL & 100 μL (X Unit)

20 μL (96-well Unit)

350 μL (Y Unit)

1 mL & up to 20 mL (LV Unit)

20 μL & 100 μL (X Unit)

350 μL (Y Unit)

1 mL & up to 20 mL (LV Unit)

20 μL

20 μL

100 μL

Electrode material

Conductive polymer

Aluminum

Low cell numbers

2 × 10⁴ to 1 × 10⁶ (20 μL)(X Unit)

2 × 10⁴ to 1 × 10⁶ (20 μL)(96-well Unit)

0.5 to 3 x 10⁵ (350 μL) (Y Unit)

2 × 10⁴ to 1 × 10⁶ (20 μL)(X Unit)

0.5 to 3 x 10⁵ (350 μL) (Y Unit)

2 × 10⁴ to 1 × 10⁶

2 × 10⁴ to 1 × 10⁶

−

Medium cell numbers (X Unit)

2 × 10⁵ to 2 × 10⁷ (100 μL)

2 × 10⁵ to 2 × 10⁷ (100 μL)

−

−

2 × 10⁵ to 2 × 10⁷

High cell numbers (LV Unit)

1 x 10⁷ to 1 x 10⁸ (1 mL)

1 x 10⁸ to 1 x 10⁹ (20 mL)

1 x 10⁷ to 1 x 10⁸ (1 mL)

1 x 10⁸ to 1 x 10⁹ (20 mL)

−

−

−

DNA Vector amount/mL sample

10 - 50 μg/mL

siRNA amount/mL sample

2 - 2000 pmol/mL (2 nM - 2 μM)+

Adherent Nucleofection

+

+

−

−

−

Compatibility with 96-well Shuttle™ Device

+

+

−

−

−

 

產品特色

FAST

遺傳物質直接進入到細胞核（和細胞質）中，快速表達蛋白

(20180608 training copy p.10) Primary NHDF-neo cells were nucleofected with TMR-labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5% PFA and analyzed by confocal microscopy.

EASY

操作流程簡單、密閉系統，避免交叉污染 

 

High Efficiency

高轉殖效率

 

  Nucleofector™ Technology 電穿孔技術
 

Lonza 的 Nucleofector™ Technology 使用優化過的電轉殖參數和針對不同細胞類型的特異性試劑的特定組合，使外源遺傳物質能夠直接轉殖到細胞核中。不需依賴細胞分裂，因此細胞在非分裂狀況下（如 rest T Cells & Neurons) 也能有效完成轉殖，加速表達。適用 DNA、RNA、small molecular、protein 、基因編輯技術例如 CRISPR RNP-complexe 和 Cas9 mRNA。

 

4D-Nucleofector System
 

以電穿孔技術為基礎，通過施加電脈衝在細胞膜中瞬間產生小孔將遺傳物質高效率的送入細胞。4D-Nucleofector System 採用模塊化設計和電穿孔技術輔以細胞特異性的電擊液以及電擊程式，不僅降低遺傳物質的使用量，更大大提升轉殖效率與細胞存活率。對於難轉染的初代細胞、幹細胞以及免疫細胞等提供另一選擇。

觸控式螢幕，可照射UV 殺菌

高存活率！Conductive polymer 材質，降低金屬離子對細胞的傷害

直接將轉質物送達至細胞核，不需透過病毒亦可有高轉殖率，2~8 小時即可觀察基因表現

依據需求選擇不同對電擊模塊，超過 700 種細胞特異性的轉殖程序，可依細胞特性選擇適合的程序

超過 4000 多篇文獻支持

使用靈活，適用反應體積從  2 x 10⁴ 到 2 x 10⁷ 細胞

4D 高轉殖效率的三必備要素

Nucleofector™裝置

預設了針對不同細胞類型的優化轉殖參數，依據細胞類型選擇不同模塊裝置 (X or Y Unit)，滿足各種應用需求。

Nucleofector™ 試劑盒

針對不同的原代細胞或細胞株以及不同模塊，Lonza 均可提供針對不同細胞的特異性轉殖試劑盒。

試劑盒包含特定的 Nucleofector™ 電擊液、補充劑、耗材、Pipettes 和 pmaxGFP™ Control Vector。

優化的專屬 Protocol

除了提供最佳的核轉染條件外，還提供全面的指導，包括細胞來源、生長條件、傳代、培養基以及轉染後培養等技巧，節省摸索時間和避免試劑耗材損耗。

LONZA 4D-Nucleofector 轉殖系統，為一個主機加上不同模塊的配置，可滿足不同細胞類型的轉染實驗需求。

LONZA 4D-Nucleofector 轉殖系統，為一個主機 (Core Unit) 加上不同模組的配置，
可滿足不同細胞類型的轉殖實驗需求。

 

 

Core Unit（必選模塊）
為 4D-Nucleofector 轉殖系統的主機，已預設了針對不同細胞類型的優化轉殖參數。

 

  • 最多可以控制 4 個 Units
     
  • 8 吋觸控式螢幕，操控所有功能模組
     
  • 直觀的操作軟體，用於設定和保存各個實驗條件
     
  • USB 接口，用於軟體更新和數據傳輸 

 

X Unit（用於各類懸浮細胞的電擊模塊）

  • 使用 single cuvette，可同時轉殖 2 個細胞樣品，每個反應體積為 100 µl，適用細胞數為 2 x 10⁵ to 2 x 10⁷ 細胞。
     
  • 使用 16-well strip，可同時轉殖 16 個細胞樣品，每個反應體積為 20 µl，適用細胞數為 2 x 10⁴ to 1 x 10⁶ 細胞。

Y Unit（用於貼附細胞的電擊模塊）

允許轉殖前後細胞直接培養於 24-well plate。使用 24-well 電擊管，可同時轉殖 24 個細胞樣品，每個反應適用細胞數為 0.5–3x10⁵ 細胞。

 

  • 適用貼附細胞
     
  • 每個反應體積為 350 μl，適用細胞數為 2.5 x 10⁴ to 1 x 105 細胞
 

使用確定的程序，以兩種形式 Nucleocuvette™ 轉殖各種原代細胞。分析轉殖 24 小時後的轉殖效率 (flow cytometry) 和活力。

 

 

4D-Nucleofector™ LV Unit

  • 密閉系統，無菌進行轉殖大量細胞轉殖，適用細胞數 1 x 10⁷ ～ 1 x 10⁹
     
  • 可利用小體積先進行實驗條件優化，條件可直接轉移進行大規模轉殖
     
  • 4D-Nucleofector™ LogWare 系統控制軟體符合 FDA 21 CFR Part 11 規範

 

     

1 mL Nucleocuvette™ Cartridge

• 1 ml 處理體積

• 適用細胞數多達 1 x 10⁸

• 無菌注射進行手動灌注

      

LV Nucleocuvette™ Cartridge

• 1 ml 處理體積

• 適用細胞數多達 1 x 10⁸

• 無菌注射進行手動灌注

 

使用相同條件進行小體積或大體積轉殖 pmaxGFP™ Vecto r 至多種細胞中。

 

 

進行高通量電轉殖實驗

對於高通量轉殖實驗或一次進行不同類型的細胞轉殖，Lonza 提供 Medium  Throughput (96-well Shuttle™ Device) 或是 High Throughput (384-well Nucleofector™ System) 機型，讓實驗可僅在短短幾分鐘內完成。此兩高通量轉殖機型為 4D-Nucleofector 系統的附加設備。以 4D-Nucleofector 轉殖系統為基礎，先於 4D-Nucleofector 系統進行轉染條件優化，成功後，可不改變轉染條件，直接用於大通量轉殖中，方便又縮短實驗時間。

 

 

96-well Shuttle

 

For Medium Throughput

 

96-well Nucleocuvette™ Plate (96-well Shuttle™ Device專用 / 試劑耗材套)

 

  • 20 µl 處理體積
  • 適用細胞數為 1 x 10⁴ to 1 x 10⁶
  • 6 x 16-well strips (可拆卸）

 

電擊材質 : Conductive polymer，無金屬離子毒害，提升細胞存活率

速度快：僅需 2 分鐘，即可一次完成 96 個獨立電擊實驗

彈性大：可適用於不同細胞數 10⁴ ～ 10⁶

適用於懸浮細胞

 

 

Cat. No.

Product

AAF-1003S

4D-Nucleofector® 96-well Unit
 

 

 

384-well Nucleofector™ System

 

  • 用於高通量的獨立平台，384 孔盤處理的時間只需要一分鐘，因此非常適合需要再現性高的篩選應用。
     
  • 384-well Nucleofector™ System 由高壓脈衝電源 Unit、操作 Unit、直觀的電腦操作軟體組成。
     
  • 384-well Nucleofector™ Kits 使用現有的 96-well Shuttle™ Protocol 與新開發的導電聚合物（conductive polymer ）384-well Nucleocuvette™ Plates。

 

 

　　 整個系統由以下三個設備組成：

 

  1. HT NUCLEOFECTOR™ PLATE HANDLER UNIT  轉盤放置兩個 384-WELL PLATES
     
  2. HT NUCLEOFECTOR™ POWER SUPPLY UNIT 產生高電壓脈衝 (HIGH VOLTAGE PULSES)
     
  3. 筆記型電腦（WINDOW 7 或 WINDOWS 10 SYSTEM) 與 HT NUCLEOFECTOR™ SOFTWARE 直觀的電腦操作軟體

 

384-well Nucleofector™

 

For High Throughput

 

384-well Nucleocuvette™ Plate

 

  • 20 µl 處理體積
  • 適用細胞數為 2 x 10⁴ to 1 x 10⁶
  • 提供 2 x 384-well & 10 x 384-well 兩種試劑套組規格

 

電擊材質 : CONDUCTIVE POLYMER，無金屬離子毒害，提升細胞存活率

速度快：僅需 1 分鐘，即可一次完成 384 個獨立電擊實驗，轉盤能夠處理兩個 384-WELL PLATES

易於使用：使用現有的 96-WELL SHUTTLE™ PROTOCOL。條件可在 4D-NUCLEOFECTOR™ 系統，96-WELL SHUTTLE™ 系統和 384-WELL NUCLEOFECTOR™ 系統之間轉移

高性能：細胞數最少可低至 2 × 10⁴ 個細胞

兼容自動化：可以無縫整合到自動液體分注操作處理環境中

適用於懸浮細胞

搭配筆記型電腦 WINDOW 7 或 WINDOWS 10 SYSTEM

應用：cDNA, RNAi 或 CRISPR libraries 篩選

 

 

Cat. No.

Product

AAU-1001

384-well Nucleofector System
 

 

Nucleofector™ II/2b Device (停產)

Nucleofector II/2b 是以單一電擊管 (  single cuvette ) 為基礎的轉殖系統，於 2001 年推出後，由於其能夠成功的將不同物質 ( 例如：DNA 與 siRNA oligonucleotides 等等 ) 轉殖至難以轉染和原代細胞中，同時也能夠使用在細菌的轉殖中，因此廣受各研究單位的喜愛。

Nucleofector™ II/2b

 

Basic Device

 

Aluminum Cuvettes

 

  • 100 μl 處理體積
  • 適用細胞數為 2 x 10⁵ to 2 x 10⁷
  • 提供 10, 25, 100 反應

 

Transfection efficiencies 24 hours postNucleofection in selected cell lines relevantfor immunology research. Cells weretransfected with either eGFP, maxGFPTMReporter Protein or H-2KK and analyzed 24hours post Nucleofection. Viability rangedfrom 60 – 90%.

 

依細胞種類不同有專屬的試劑套組，一套試劑適用所有轉殖物

高效轉染：單一電擊管的基因轉殖 (100 μl) - plasmid DNA 效率高達 90％, siRNAduplexes 效率高達99％，也適用於peptide、protein 或 small molecules

易於使用的技術：超過 150 個 ready-to-use 優化程序，Lonza Cell Base 包含使用者開發的 Protocol 和數據超過 650 多種細胞類型

可信賴的結果：超過 4000 篇 citation，轉職後，細胞保有高活性並保留細胞功能

適用於懸浮細胞

 

 

Cat. No.

Product

AAB-1001

Nucleofector™ 2b
 

 

應用領域

熱門話題-CRISPR 熱門話題-免疫細胞治療 細胞分析與影像系統-電轉殖系統