Apoptosis/Cell cycle/Proliferation試劑

 

Apoptosis

 

  Annexin V Binding Assay
 

  • 偵測細胞膜內的 PS (phosphatidylserine) 外翻 (細胞凋亡最早期的特徵)
     
  • 染色操作僅需 15 分鐘

 

  Mitoscreen (JC-1) Kit
 

  • 可偵測粒線體膜電位變化
     
  • 適用於流式細胞儀偵測

 

  MitoStatus Reagents
 

  • 可偵測粒線體膜電位變化
     
  • 可以與 Annexin V 同時偵測 
     
  • 適用於流式細胞儀分析

 

  Caspase-3 Assay

  • 適用於流式細胞儀分析
     
  • 偵測活化態的 caspase 3
     
  • 試劑組合分別有 PE/ FITC 螢光可以選擇,還包含實驗需用的 buffer Cytofix/Cytoperm™ Fixation and Permeabilization Solution、Perm/Wash™ Buffer

 

  Live Cell Caspase Probes

  • 適用於流式細胞儀
     
  • 偵測 Active caspase family (caspase-1, -2, -3, -6, -8, -9, and -10) 表現程度

  TUNEL Assay

  • 偵測細胞 DNA Fragmentation ,也可同時分析細胞週期 (Cell Cycle)
     
  • 適用於懸浮型或貼附型細胞的實驗
     
  • 適用於流式細胞儀分析

 

 

Cell cycle

 

  PI/RNase Staining Buffer
DNA 含量的測定是細胞週期偵測的指標

  • PI 是最常用來偵測 DNA 含量的螢光染劑。其作用原理是細胞固定打洞後,PI 會染上核酸 (DNA & RNA) ,並搭配 RNase 處理後,再進行染色後 , 以流式細胞儀測定 DNA 含量。
     
  • PI 可用 488 nm 雷射激發,散射波長約 617 nm。
     
  • Hoechst 33342 需用 UV 雷射激發,散射波長約 461 nm。

 

 

Cell Proliferation

 

  BD Horizon™ Cell Proliferation Dyes CFSE & Violet Proliferation Dye 450 (VPD 450)
 

  • VPD 450 染劑本身是非螢光型態的物質,經由擴散作用到細胞內,其 ester group 會被非專一性的酯酶 (esterase) 水解 (hydrolysis) 成螢光型態,並以 succinimidyl ester group 共價結合細胞內蛋白質的胺基 (amino group)。死細胞就不會發螢光。
     
  • 活細胞分裂時,每個子細胞所含螢光量約為母細胞的一半,可藉由螢光量的減少偵測細胞增生。
     
  • 能耐受細胞固定液與打洞液,能搭配 muliti-color stain 增加實驗設計彈性。

 

  BrdU Flow Kit
 

  • BrdU 偵測新合成 DNA
     
  • 直接測定 DNA 合成,是細胞增殖檢測的最準確方法之一,方式就是在實驗中加入 thymidine 的類似物,Bromodeoxyuridine (BrdU)。在 S 期的時候,BrdU 可以代替 thymidine,崁入新合成的 DNA 內。再用 BrdU 的抗體與其結合,以流式細胞儀 (Flow Cytometry) 偵測 BrdU-positive cell 的表現情形。
     
  • Kit 有 FITC/APC 螢光可以選擇
     
  • 適用於流式細胞儀分析

 

  EdU Cell Proliferation Assay
 

  • EdU 偵測新合成 DNA 
     
  • EdU (5-ethynyl-2 -deoxyuridine) 是一種 thymidine 類似物,在細胞增殖時能夠插入正在複製的 DNA 分子中,基於 EdU 與染料的共軛反應可以有效地檢測處於 S 期的細胞。
     
  • EdU 染料分子比 BrdU 抗體小,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性 (酸解、熱解、酶解) 處理,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。
     
  • Kit 有螢光可以選擇
     
  • 適用於流式細胞儀或 Bioimaging 分析