Rockland Primary Antibody / 一抗

 

什麼是一抗(Primary Antibody)?

一級抗體(Primary Antibody,簡稱一抗)是能直接辨識並結合目標抗原(蛋白質、胜肽或小分子)的免疫球蛋白,決定了免疫實驗的「專一性」。在研究中,一抗廣泛應用於 Western Blot(WB)、免疫組織化學染色(IHC)、免疫螢光染色(IF)、ELISA 及流式細胞分析(Flow Cytometry)等實驗。
依照實驗需求,一級抗體可分為未標記定(unconjugated)及直接標記(conjugated)兩種。未標記的一級抗體通常需要搭配二級抗體進行訊號偵測;直接標記的一級抗體則已連接螢光染劑或其他偵測分子,可直接偵測目標抗原,能省去二級抗體的使用。
選擇一級抗體時,應依據目標抗原、抗體類型、適用實驗、反應物種及偵測方式等條件進行評估,以選擇符合實驗需求的抗體。騰達行為 Rockland 認證的台灣代理商,提供 Rockland 一抗的詢價、訂購與技術諮詢。

 

 

不同抗體特性與分類

分類 特性與製程

Monoclonal Antibodies
單株抗體

由單一 B 細胞株(融合瘤細胞)產生,專一辨識抗原上的特定表位(epitope)。具有高專一性、低交叉反應及良好的批次一致性。
Polyclonal Antibodies
多株抗體


 
由多個 B 細胞株產生,可同時辨識同一抗原上的多個表位。通常具有較高的偵測能力與訊號,應用範圍廣。

Recombinant Antibodies
重組抗體

透過免疫動物產生並篩選出特定抗體序列,再利用 CHO 或 E. coli 等表現系統製備。抗體序列明確,具有良好的批次間一致性與重現性,並可製成完整抗體、scFv、Fab 等不同形式。


 

 

功能性標定抗體

分類 什麼時候會需要
Epitope-Tag 我的蛋白有接 His、FLAG、Myc 或 HA 標籤
RFP & GFP 我的蛋白有接螢光蛋白(GFP、RFP 等)
Loading Control 需要確認各樣品的蛋白量一致

 

Epitope-Tag(表位標籤抗體):偵測貼了「名牌」的蛋白

研究者在做重組蛋白時,常會在目標蛋白的一端接上一小段人工設計的短胜肽,當作「名牌」,常見的有 FLAG、6X His(6 個組胺酸)、Myc、HA、V5、GST、MBP。很多蛋白沒有好用的專屬抗體,這時改用抗名牌的抗體,只要蛋白貼了同一張名牌,用同一支抗體就能偵測到。
> 常見用途:確認蛋白有沒有表現(WB)、把蛋白抓下來純化(IP)、觀察蛋白在細胞內的位置(IF)。
> 代表產品:200-301-382(Mouse Anti-6X His)、600-401-382(Rabbit Anti-6X His)。

 

RFP & GFP(紅、綠螢光蛋白抗體):讓螢光融合蛋白看得更清楚

GFP 是綠色螢光蛋白,RFP 是紅色螢光蛋白,研究者會把它們接在目標蛋白上,讓蛋白在顯微鏡下發光,方便追蹤蛋白的位置。它們可以看成一種特殊的名牌,因為使用量很大,所以原廠獨立成一類。既然本身會發光,為什麼還要用抗體?
> 樣品固定後螢光可能變弱,用抗體可以把訊號放大。
> 做 WB、IP 這類看不到螢光的實驗,只能靠抗體偵測。
> 想把 GFP 融合蛋白純化下來。


代表產品
> 600-401-379(Rabbit):經 Pre-adsorbed 處理以降低非專一性背景,可辨識 RFP、mScarlet、tdTomato 等,已有上千筆文獻引用。
> 200-301-379(Mouse):單株 clone 8E5.G7,可辨識 RFP 與 mCherry,適合需要單一表位專一性與低背景的實驗。
> 600-901-215(Chicken):雞 IgY 與哺乳動物 IgG 親緣較遠,搭配兔、鼠、羊來源的抗體時,容易設計免疫螢光共染。

 

Loading Control(內參抗體):Western blot 的「校正尺」

做 Western blot 時,每個樣品放進膠裡的蛋白量應該一樣,才能比較目標蛋白的多寡,但實際上很難完全一致。內參抗體針對的是每個細胞都穩定表現、不會因實驗處理而改變的蛋白,例如 Beta Actin、Alpha-Tubulin、GAPDH。每條 lane 都偵測內參,就能確認各 lane 的蛋白量是否一致,再據此校正目標蛋白的結果。

 

代表產品
> 600-401-886(Anti-Beta Actin)。

 

 

 

研究領域(Research Areas)

Rockland 一抗依研究領域分為八大類:Cancer 癌症研究、Cell Biology 細胞生物學、Cell Signaling Pathways 細胞傳導途徑、COVID-19 新冠病毒研究、Epigenetics 表觀遺傳學、Microbiology 微生物學、Neuroscience 神經科學、Obesity & Diabetes 肥胖與糖尿病研究。

代表標的

> Cancer:AKT、TNF-α、IL-1β
> Neuroscience:NOTCH1、Beta Amyloid、DELTA-4
> Epigenetics:NFκB p65、Histone H2AvD pS137
> Cardiovascular:Fibrinogen、TLR4
> Obesity & Diabetes:Collagen Type I ~ Collagen Type VI

 

 

可依照研究領域選擇 Rockland 提供的 marker

Cancer   Cell biology   Cell signaling
pathways
  COVID-19
             
Epigenetics   Microbiology   Neuroscience   Obesity &
Diabetes

 

 

延伸閱讀與原廠連結

Rockland 商品分類
Primary Antibodies(一抗總覽)
Monoclonal Antibodies(單株抗體)
Polyclonal Antibodies(多株抗體)
Recombinant Antibodies(重組抗體)
Epitope-Tag Antibodies(表位標籤抗體)
RFP & GFP Antibodies(螢光蛋白抗體)
Loading Control Antibodies(內參抗體)
一抗挑選技術文件
Fit-for-Purpose Antibodies