Exosome Research

 

Extracellular vesicles 是由細胞產生的奈米等級小囊泡,主要的成員:Exosomes、Microvesicles 和 Apoptotic bodies,可以做為細胞間溝通的聯繫。幾乎所有的細胞都會製造、分泌,在血液、尿液、唾液、脊髓液等各種體液都可以發現它的蹤跡。

 

最初發現這個小囊泡時,科學家以為它只是一種細胞代謝所產生的廢棄物,而後發現它含有細胞特異性的蛋白質、脂質和核酸,可以傳遞訊息,在細胞之間的聯繫扮演著重要的角色,參與各種生物作用,如免疫、發炎反應、 血管生成、凋亡、凝血等,也發現它跟腫瘤細胞轉移有很重要的關係。

 

不同細胞會分泌細胞特異性的 Extracellular vesicles,因此可以作為疾病診斷的指標。也因為有傳遞、保謢訊號的功能,有科學家把它當作藥物傳遞的新工具,所以 Extracellular Vesicles 的研究越來越受到重視。而 SBI 出了一系列針對 Exosome 研究需要的工具,相關應用有 Isolation、Detection、 Quantitation、 Labeling、 Biomarker Discovery 以及 Engineering。

 

要進行 Exosome 研究的第一步:Exosome Isolation,

可以依照實驗目的和樣品來源選擇適合的純化試劑。

 

收集 Total EV 之工具

 

  • ExoQuick Family
     
  • SmartSEC HT EV Isolation System
     
  • Exo-Urine EV Isolation Kit

 

收集 Subpopulation EV 之工具

 

  • Exo-Flow Series

 

 

使用 ExoQuick Family,可以用三步驟輕鬆收集 EV

 

若有 protein contamination 的疑慮,可以選擇 ExoQuick ULTRA 有效降低 background

 

貨號

產品

包裝

適用樣品

特色

EXOQ5A-1, EXOQ20A-1

ExoQuick exosome precipitation solution

5 ml/20 ml

Serum, plasma & ascites

一般EV的純化

EXOTC10A-1, EXOTC50A-1

ExoQuick-TC exosome precipitation solution

10 ml/50 ml

All other biofluids & cell culture medium

EXOLP5A-1

Exo-Quick-LP

5 reactions

Plasma/serum

移除lipoproteins,適合分析來自血樣EV miRNA

EXOQ5TM-1

ExoQuick Plasma prep

75 reactions

De-fibrinates plasma

利用Thrombin 移除fibrin,減少汙染物

EXOCG50A-1

ExoQuick-CG

50 ml

All biofluids

GMP 等級,適合 pre-clinical in vivo 實驗

EQULTRA-20A-1

ExoQuick ULTRA

20 reactions

Serum, plasma & ascites

利用Resin移除protein contamination,提高EV純度,適合Proteiomics分析

EQULTRA-20TC-1

ExoQuick-TC ULTRA

All other biofluids & cell culture medium

 

 

 

若是樣品數量多的血清血漿,可選擇 SmartSEC HT EV Isolation System,可彈性處理 1-96 個樣品

利用 Size exclusion chromatography 原理,可以大幅減少 Albumin, Immunoglobin 的干擾

 

若樣品來源為尿液,可選擇 Exo-Urine EV Isolation Kit

獨家的 buffer 系統搭配 size-exclusion chromatography (SEC),減少 Tamm-Horsfall Protein (THP) / uromodulin 干擾。

 

若要抓取 subpopulation EVs,可以選擇 Exo-Flow 2.0,利用 Exo-Flow beads 與有興趣的抗體形成 beads-antibody complex,進而抓取 subpopulation,放大 Exosome 的訊號,利於用 flow cytometry 分析。

利用 Exo-Flow 2.0 beads 各別抓取帶有 CD81, CD63, CD9 的 Exosome,後續做 western blot 確認 Exosome 相關 marker-TSG101 的表現。

亦可做多重 marker 分析,用 CD9 或 CD63 beads 抓取 Exosomes,並同時染 CD14-FITC 抗體。


Total EVs Isolation

Polymer Based
利用 polymer 形成的網狀物沉澱 40 – 200 nm 的 particle (包括 exosome) 

 

  • ExoQuick (ULTRA)
     
  • ExoQuick-TC (ULTRA)
     
  • ExoQuick-CG
     
  • ExoQuick-LP

 

SEC Based
利用 Size exclusion chromatography 的方式分出 30~200 nm 的 Extracellular Vesicles (EVs),排除蛋白質的干擾

 

  • SmartSEC™ HT EV Isolation System
     
  • Exo-Urine™ EV Isolation Kit

 

 

Marker Specific EVs Isolation

Affinity Based
利用抗原抗體的結合特異性並搭配磁珠進而純化出特定族群的 EVs

 

  • Exo-Flow 2.0
       

 

 

 

分析 EV 的蛋白質表現
透過一般的 Western blot 或是 flow cytometry 分析
 

  • Exosome Antibodies
     
  • Exosome Antibodies Array
     
  • ExoFlow-ONE EV Labeling 

 

 

 

 

About EV Quantitation

 

透過 EV makers 的表現,定量 particle number

Antibody
 

  • EXOELISA-ULTRA
     
  • EXOELISA

 

Enzymatic
 

  • EXOCET
     
  • FLUOROCET

 


Exosome Labeling
以特殊染劑標記 exosome,可用於 in-vitroin-vivo 的追蹤
 

  • ExoGlow™-Protein
     
  • ExoGlow™-Membrane
     
  • ExoGlow™-RNA
     
  • ExoGlow™-Vivo

 

 

 

 

About EV Biomarker Discovery

 

研究 EVs 的核酸、蛋白質,找出指標性的生物標誌

qPCR
 

  • SeraMir Exosome RNA purification
     
  • XCF ™ COMPLETE Exosome & cfDNA Isolation

 

Mass Spec
 

  • ExoMS™ Surface Protein Capture
     
  • ExoMS™ Total Protein Capture

 


 

About EV Engineering

 

改造 Exosome,使其可以包裏 protein 或 small RNA,或者是使其可被特殊細胞或器官吸收

Delivery
 

  • Exo-Fect (siRNA/miRNA)
     
  • EV-Entry System

 

Targeting System
 

  • Xstamp
     
  • Xstamp Pro

 

Protein Packing
 

  • XPack

 

miRNA Packing
 

  • XMIRXpress

 


 

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